COLETA DE SANGUE DE RATO POR EXSANGUINAÇÃO
Objetivo: Obter sangue de ratos por exsanguinação, para ser utilizado em experimentos.
Cada rato adulto fornece aproximadamente 10 ml. As quantidades especificadas são para um total de 50 ml de sangue
Material biológico: 5 ratos adultos
Material procedimental:
solução de uretana em água destilada,100 mg/ml |
Tesoura para pele |
Balança para pesar ratos |
5 conjuntos de seringa de vidro de 10 ml com agulha 25 X 8 |
seringa e agulha para injeção intraperitonial |
1 ampola de heparina (Liquemine Roche), 0,25 ml=5000 U.I. |
suporte para rato anestesiado | Solução Ringer ou NaCl 9 g/l |
Algodão | 1 béquer de aprox. 20 ml |
Pinça com dentes para pele | proveta ou erlenmeyer de 50 ml |
Procedimentos:
3.Colocar o rato no suporte.
4.Molhar com água os pelos do abdome. Abrir o abdome por uma incisão mediana, utilizando a pinça e a tesoura.
5.Afastar as vísceras abdominais para a direita do animal, expondo a gordura retroperitonial, atrás da qual se encontra a aorta.
6.Expor a aorta retirando a gordura retroperitonial com algodão seco.
7.Puncionar a aorta com a seringa dotada da agulha 25 X 8 e injetar a solução de heparina que nela foi colocada.
8.Extrair o sangue. Será obtido um volume de 10 ml, aproximadamente.
9.Retirar a agulha da seringa e colocar o sangue na proveta (ou erlenmeyer).
10. Lavar com água imediatamente a seringa e a agulha utilizadas.